灵敏又特异,稳定高封闭!热启动Taq DNA聚合酶让PCR实验“酶”好加倍

发布日期:
2023-09-07

灵敏又特异,稳定高封闭!热启动Taq DNA聚合酶让PCR实验“酶”好加倍

PCR技术是现代分子生物学的重要基石,而Taq DNA聚合酶则是PCR 技术辉煌发展过程中的里程碑。通过将Taq 酶应用到PCR中,其优异的热稳定性可使PCR检测的特异性、灵敏度及扩增成功率均得到大大提升。




德奥平热启动Taq DNA聚合酶


Taq DNA聚合酶在 20℃~37℃下仍有一定聚合酶活性,容易在检测试剂配制和预热过程产生非特异性的扩增。对Taq DNA 聚合酶进行热启动修饰可有效减少非特异性扩增,也是提高PCR反应特异性、灵敏度的常用手段[1]。目前Taq DNA聚合酶较为常用的修饰方法为化学修饰和抗体修饰法[2]德奥平核心技术团队多年来始终坚持自主创新研发,经迭代优化所生产的热启动Taq DNA聚合酶系列产品品质性能媲美进口,适用于全平台多场景的PCR高效特异性扩增。Taq酶产品系列包括裸酶、抗体修饰酶及化学修饰酶,可最大化满足客户的多样化需求。



产品优势



✓  强扩增性 

✓  高封闭效率 

✓  高稳定性 

✓  重复性好

✓  高灵敏度、高特异性  

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抗体修饰热启动Taq DNA 聚合酶

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本品由Taq单克隆抗体和Taq DNA polymerase混合制备而成,通过抗体修饰封闭了低温以及室温的酶活性,在加热至变性温度时抗体变性,解除封闭从而释放活性,可以大大降低错配或引物二聚体引起的非特异性扩增,提高扩增的灵敏度和特异性。本产品适用于以DNA为模板(如DNA病毒)的探针法定量PCR检测,能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好可信度高。本品亦可用于常规PCR或RT-qPCR。



化学修饰热启动Taq DNA 聚合酶

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本制品是一种基于化学修饰法的重组热启动 Taq DNA 聚合酶,在低温和室温下没有活性,从而最大程度降低非特异扩增和引物二聚体的形成,提高扩增的灵敏度和特异性。在95℃热激活5-10 min条件下,使抑制失效,Taq 酶活力得到恢复。此外该产品没有检测到3’到 5’校正外切酶活性,可用于qPCR的检测。本品配有优化的PCR缓冲体系,配置体系前只需加入引物、模板以及水,大大简化了配制步骤。本品适用于复杂模板DNA的PCR扩增,复杂模板cDNA的PCR扩增(RT-PCR),单链或双链DNA的测序,定点突变和探针法的实时荧光定量PCR。







Taq DNA

性能评估报告





01

扩增性能测试


运用化学修饰的热启动酶Chem-Taq开发的一步法RT-qPCR Mix与商品化检测试剂(已取得CFDA注册认证)对比,扩增性能相当。

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02

50℃下封闭性能测试


德奥平抗体修饰酶的最终荧光值低于Taq DNA聚合酶裸酶最终荧光值的35%,性能良好。


▷ 荧光值

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03

qPCR释放性能测试


德奥平抗体修饰酶与进口品牌Taq酶的扩增Ct值差别小于2。德奥平抗体修饰酶的信号值可达到进口Taq酶的103%以上,性能表现更优。


▷ Ct值

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▷ 信号值

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▷ 扩增曲线

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04

抗体修饰热启动Taq酶批间差测定


测试组和上一批次的∆Ct值≦1,∆Rn值≦0.2,批间差小,工艺品质稳定有保障。


▷ 扩增曲线

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05

稳定性能测定


化学修饰Taq酶4℃放置7天后Ct值变化量小于0.89。37℃放置7天后,扩增低浓度模板时Ct值增大0.7。冻融20次后对低浓度模板的灵敏性提高。

▷ Ct值

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▷ 信号值

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抗体修饰Taq酶37℃放置50天后,Ct值变化小于0.4,扩增低浓度模板时的信号值降低了0.12,抗体修饰Taq酶更稳定。

▷ Ct值

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▷ 信号值

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德奥平生物      

   

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平生物成立于2012年,拥有超过10余年经验的专业技术研发团队,荣获多项发明专利。公司已构建体外诊断原料研发平台(涵盖引物及探针合成、核酸分子检测原料、免疫试剂原料、生化试剂原料、血凝试剂原料、荧光免疫层析POCT大板、生化试剂大包装、血凝试剂大包装、校准质控品等10大产品体系)、自动化高通量DNA读写平台、RNA智能设计与合成平台、蛋白抗体制备平台、科研试剂耗材供应平台等五大核心技术平台。


德奥平生物采用10万级/万级净化车间,进行产品生产和包装,严格执行ISO13485:2016质量管理体系规范,秉持“匠心品质,成就客户”的发展理念,致力于为体外诊断和科研领域客户,持续提供高质量的产品和服务。



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