《B型利钠肽及N末端B型利钠肽前体实验室检测与临床应用中国专家共识》明确指出——
外周循环中的BNP1~32可被脑啡肽酶、二肽基肽酶-4及胰岛素降解酶等降解为多个肽段,如BNP1~30、BNP1~29、BNP1~25、BNP1~26、BNP3~32、BNP3~29、BNP4~32、BNP4~31、BNP4~29、BNP5~32、BNP5~31、BNP5~29、BNP5~27和 BNP5~26等,体外细胞实验结果显示这些BNP短肽段的生物活性与BNP1~32完整肽段相比差异无统计学意义。为降低不同BNP 检测平台间的差异,最佳的抗体靶表位位于BNP6~26区段(包含环状区在内),这可避免漏检N端或C端被降解的BNP短肽段。
#BNP 检测试剂的抗体选择
· 不同商品化BNP试剂的抗体表位
德奥平对全长BNP免疫获得的羊血清进行多级亲和免疫纯化获得针对BNP 15-23aa的高亲和力羊多抗,配合6-14aa的人鼠嵌合抗体可实现:
► 中段表位,避免漏检---指南推荐
► 极高的灵敏度---LoD<1pg/mL
► 极高的特异性---无惧HAMA
· 德奥平BNP配对抗体在AP化学发光中的性能表现
· BNP抗体01功能性验证
原始数据:样本(pgml)
► 酶标
► 平均值
► 梯度
► 信号值偏差
► CV
结论——
BNP抗体三个批次CV均在3%范围内,批间差小,重复性好。
待测批次与对照批相比,工作校准品信号偏差均在7%范围内。
采用特殊设计的proBNP (Plus proBNP)蛋白,表现出显著优于野生型proBNP(WT proBNP)的稳定性,是BNP或者NT-proBNP校准和质控品原料的首选。
► 配对抗体的临床相关性验证
新配对:NT-proBNP Cap02+Det02
和进口知名品牌化学发光试剂相关性对比结果,数据呈显著相关(R²=0.982)
► 蛋白稳定性验证
- NT-proBNP冻干校准品第七天考核 -
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