

✓ 全新一代内因子蛋白经过多步柱层析,1mol内因子可以结合>0.95mol的VB12

● 德奥平IF桥接抗体包被在磁珠上,加入不同浓度的内因子蛋白(IF):0-0.5-5-50ng/mL,表现出良好的剂量反应,证明可以有效桥接IF蛋白。

● 为了进一步确认IF桥接抗体同内因子蛋白的结合位点是否会干扰VB12的结合,设计了如下实验方案——


01. IF桥接抗体,随着VB12浓度增加,其反应信号值没有变化,说明VB12和IF桥接抗体在内因子蛋白上的结合位点相互没有干扰。
02. IF竞争抗体,随着VB12浓度增加,其反应信号值不断下降,说明VB12和IF竞争抗体在内因子蛋白上的结合位点存在竞争反应。
● 相同的体系下,桥接方案表现出明显灵敏度提升,且大幅降低内因子用量(0.1ng内因子/人份)。

通常基于SMCC/SATA等方案制备的内因子IF-ALP偶联物存在非均质性,且可能会破坏内因子上的VB12结合位点。内因子IF-ALP(SDC),连接位点远离VB12结合域。
将德奥平内因子IF-ALP,替代商品化VB12-AP试剂的相应组分,表现出更优的信噪比和灵敏度,且偶联物的使用浓度仅为5ng/mL。

同时,进一步的评价了德奥平内因子IF-ALP的热加速稳定性,5ng/mL浓度下37℃保存7天,活性保留率超过90%。

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