20 世纪 60 年代,液相分子杂交法的建立意味着分子诊断时代的开启。分子诊断是精准医学实践中不可或缺的一个重要手段。传统的分子诊断技术主要依赖于普通PCR(聚合酶链式反应Polymerase chain reaction)技术,该技术特异性强、灵敏度高,但需要昂贵的控温循环仪,难以推广到现场检测。今天就给大家介绍一种可以快速高效核酸检测的新技术—RPA重组酶聚合酶扩增技术,也是我们承担的一项北京市科技重大专项(“体外诊断用核酸分子诊断关键原料的工业化应用”)的研究成果。
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RPA技术的反应原理是什么呢?
该技术主要模仿 T4 噬菌体内的核酸复制机制,依赖重组酶和单链结合蛋白在体外恒温条件下实现DNA 模板的特异性识别与结合,并通过链置换 DNA 聚合酶实现模板DNA 的扩增。可在 23—45 ℃下连续进行反应,反应时间只需 5—20 min,特异性强、灵敏度高,非常适用于疾病诊断和现场检测。
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RPA技术的关键是什么呢?
RPA技术的关键在于扩增引物和探针的设计,与传统 PCR引物不同,一般不能套用荧光定量PCR的原料,也没有专用的设计软件进行设计,因此,需针对不同靶标进行一系列优化引物设计,才能达到好的检测效果,德奥平生物有专用的RPA引物设计经验可借鉴,欢迎一起探讨。
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RPA技术的优点
1.快速检测:5-20min
2.操作简单:可同时快速检测多种样品
3.无需热循环过程:摆脱任何热循环仪器束缚,贫瘠条件亦能完成检测
4.设备要求低,非常适用于现场样品检测
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德奥平生物推出自主研发RPA关键原料
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