1.PfuDNA聚合酶具有很强的3’外切核酸酶活性，因此在PCR产物3’为平末端，不适合TA克隆。要进行TA克隆需用TaqDNA聚合酶对PCR产物进行加A处理。

2.PfuDNA聚合酶为高保真酶，忠实性是TaqDNA聚合酶的18倍。

3.建议在冰上配置PCR反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

4.如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性。

5.本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个最优的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl2/MgSO4。6.因该酶与含有尿嘧啶和次黄嘌呤的DNA模板结合后会抑制DNA聚合反应，故dUTP、dITP和含有这些核苷酸的引物不能用于PfuDNA聚合酶催化的PCR扩增。