1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2.避免反复冻融Mix,开启后尽量在3个月内使用完毕。
问题描述 | 可能原因 | 解决办法 |
扩增曲线混乱或缺失 | 仪器设置不正确 引物或模板浓度不当 | 根据仪器说明书调整设置 调整引物和模板浓度 |
PCR反应条件不当 |
降低退火温度、延长延伸时间等。对于GC含量高的目标片段,可适当延长变性时间
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引物或模板存在高级结构 | 重新设计引物 |
样品纯度不好 | 进一步纯化样品 |
定量值 重复性差 | 仪器设置不正确 | 根据仪器说明书调整设置 |
样品纯度不好 | 进一步纯化样品 |
引物浓度不当 | 尝试适当提高引物浓度 |
PCR反应条件不当 | 尝试降低退火温度、延长延伸时间等 |
引物设计不当 | 重新设计引物,减少目标片段的高级结构 |
实验操作误差 | 严格按照操作规程,保证反应体系中各组分体积精确 |
空白对照 出现信号 | 出现污染 |
首先更换空白对照的水;如果还发生同样情况,继续更换引物、枪头、PCR管或启用新的Mix
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